补肾化痰方对去卵巢大鼠骨形成的影响及其作用机制研究

• 作者: 向楠 周亚娜 周广文 张妍 张麟 李章青 胡娅
• 来源期刊: 中医正骨
• 关键词: 骨质疏松 补肾化痰方 信号传导 骨形态发生蛋白质2 Runt相关转录因子2 大鼠,Sprague-Dawley 动物实验
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 12-18
• 页数: 7页
• 字数: 6003字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6015.2018.10.003

摘要

目的:观察补肾化痰方对去卵巢大鼠骨形成的影响及其作用机制.方法:将30只6月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和补肾化痰组,每组10只.模型组和补肾化痰组大鼠手术摘除双侧卵巢,假手术组不摘除卵巢,只切除卵巢周围与双侧卵巢质量相等的脂肪组织.造模术后5周开始,补肾化痰组以0.94 g· mL-1补肾化痰方药液灌胃,假手术组和模型组以等体积生理盐水灌胃,均每天1次,连续干预8周.药物干预结束后,将所有大鼠处死,摘除双侧眼球取血检测血清骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-2、Runt相关转录因子(Runt related transcription factor,RUNX)-2含量,取左侧股骨行Micro CT扫描测定骨密度、骨小梁数量、骨小梁平均厚度、骨小梁分离度,取右侧股骨上端部分骨片以蛋白免疫印迹法测定骨组织中BMP-2、RUNX-2含量,取右侧股骨下端部分骨片以免疫组织化学法检测BMP-2、RUNX-2的定位.结果:①一般情况.所有大鼠均在造模手术麻醉3～4h后完全清醒,正常进食,1周后切口完全愈合.药物干预过程中,模型组1只大鼠死亡、补肾化痰组2只大鼠死亡.②血清BMP-2、RUNX-2含量检测结果.3组大鼠的血清BMP-2含量比较,差异有统计学意义[(245.40±10.10)pg·mL-1,(111.03±29.75)pg·mL-1,(190.35±14.00) pg·mL-1,F=109.998,P=0.000];模型组、补肾化痰组的血清BMP-2含量均低于假手术组(P =0.000,P=0.000),补肾化痰组的血清BMP-2含量高于模型组(P=0.000).3组大鼠的血清RUNX-2含量比较,差异有统计学意义[(4 131.04±277.39) pg·mL-1,(1 601.09±266.10) pg·mL-1,(3 134.90±202.33) pg·mL-1,F=237.192,P=0.000];模型组、补肾化痰组的血清RUNX-2含量均低于假手术组(P =0.000,P=0.000),补肾化痰组的血清RUNX-2含量高于模型组(P =0.000).③股骨Micro CT扫描结果.3组大鼠骨密度比较,差异有统计学意义[(556.90±8.86) mg HA·cm-3,(498.81±9.26) nmg HA·cm-3,(530.17±10.70) nmg HA·cm-3,F=90.488,P=0.000];模型组、补肾化痰组的骨密度均低于假手术组(P=0.000,P=0.000),补肾化痰组的骨密度高于模型组(P=0.000).3组大鼠骨小梁数量比较,差异有统计学意义[(2.65±0.32)个·mm-1,(1.74±0.22)个·mm-1,(2.41±0.33)个·mm-1,F=23.900,P=0.000];模型组的骨小梁数量少于补肾化痰组和假手术组(P =0.000,P=0.000),补肾化痰组的骨小梁数量与假手术组比较,差异无统计学意义(P =0.224).3组大鼠骨小梁平均厚度比较,差异有统计学意义[(109.33±16.12) μm,(79.27±18.17)μm,(95.73±11.38)μm,F=8.730,P=0.001];模型组的骨小梁平均厚度低于假手术组(P=0.001),补肾化痰组的骨小梁平均厚度分别与假手术组和模型组比较,差异无统计学意义(P=0.181,P=0.098).3组大鼠骨小梁分离度比较,差异有统计学意义[(350.95±68.46) μm,(472.33±33.70) μm,(406.68±47.77) μm,F=12.460,P=0.000];模型组、补肾化痰组的骨小梁分离度均高于假手术组(P=0.000,P=0.036),补肾化痰组的骨小梁分离度低于模型组(P=0.017).④股骨组织中BMP-2、RUNX-2蛋白含量检测结果.3组大鼠股骨组织中的BMP-2含量比较,差异有统计学意义(0.73±0.03,0.26±0.02,0.48±0.02,F=738.111,P =0.000);模型组、补肾化痰组股骨组织中的BMP-2含量均低于假手术组(P=0.000,P=0.000),补肾化痰组股骨组织中的BMP-2含量高于模型组(P=0.000).3组大鼠股骨组织中的RUNX-2含量比较,差异有统计学意义(0.67±0.03,0.36±0.03,0.47±0.02,F=286.493,P=0.000);模型组、补肾化痰组股骨组织中的RUNX-2含量均低于假手术组(P=0.000,P=0.000),补肾化痰组股骨组织中的RUNX-2含量高于模型组(P =0.000).⑤股骨组织中BMP-2、RUNX-2蛋白定位检测结果.BMP-2、RUNX-2的阳性表达主要位于骨髓基质细胞胞浆及骨小梁周边成骨细胞中,光学显微镜下阳性表达蛋白呈棕黄色颗粒.结论:补肾化痰方能通过调节BMP-2/Smads/RUNX-2信号转导通路,促进去卵巢大鼠的骨形成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡娅		38	125	6.0	7.0
2	向楠		88	447	12.0	17.0
3	周广文		20	39	4.0	5.0
4	周亚娜		15	77	6.0	8.0
5	李章青		5	8	2.0	2.0
6	张妍		5	3	1.0	1.0
7	张麟		2	8	2.0	2.0