电转条件对Cas9核糖核蛋白基因编辑效率的影响

• 作者: 夏凯 孔华庭 张瑜 诸颖 闫庆龙 韩玲
• 来源期刊: 核技术
• 学科: 工学
• 关键词: Cas9 核糖核蛋白(Cas9 RNP) 电转条件 直接输运 编辑效率 生物相容性
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 核物理、交叉学科研究
• 页码范围: 77-81
• 页数: 5页
• 分类号: TL99
• 字数: 3614字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11889/j.0253-3219.2018.hjs.41.080502

摘要

直接向细胞内输运CRISPR/Cas9核糖核蛋白复合物(Cas9 RNP)对于进行各种基因编辑、基因表达调控和DNA/RNA成像具有重要意义.电转是向细胞内导入Cas9 RNP的重要方法.本工作研究了电压、脉冲长度及脉冲次数等电转条件对Cas9 RNP细胞内基因编辑效率的影响,评估了不同电转条件下的细胞存活率.结果显示:电压为1300 V,脉冲次数为1,脉冲宽度为30 ms时,Cas9 RNP具有较高的基因编辑效率且生物安全性较好.本工作为CRISPR/Cas9复合物进一步的生物医学应用提供了指导依据.