聚焦超声介导阳离子脂质体携带HSV-TK增强基因转染及联合更昔洛韦对大鼠胶质瘤C6细胞的影响

• 作者: 严飞 张怡 方义杰 李文娟 洪国斌 潘敏 邓志婷
• 来源期刊: 中华实用诊断与治疗杂志
• 关键词: 脑胶质瘤 C6细胞 单纯疱疹病毒胸苷激酶 阳离子脂质体 基因转染 聚焦超声 更昔洛韦 大鼠
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 417-421
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13507/j.issn.1674-3474.2018.05.001

摘要

目的 探讨聚焦超声对载单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因阳离子脂质体体外基因转染的影响,及其联合更昔洛韦(ganciclovir,GCV)对大鼠脑胶质瘤C6细胞的影响.方法 制备含HSV-TK基因质粒,利用阳离子脂质体转染至对数期大鼠胶质瘤C6细胞,并随机分为脂质体组和超声1、2、3、4min组,脂质体组加入含9μg阳离子脂质体-HSV-TK基因质粒的100μL培养液;超声1、2、3、4 min组在脂质体组基础上分别给予体外超声(1 MHz,功率3 W/cm2,电压150mvPP)辐照1、2、3、4min.5组C6细胞均于37℃、体积分数5％CO2培养箱,含体积分数10％胎牛血清的高糖DMEM 完全培养液,继续培养48h.转染48h后,荧光显微镜下观察载HSV-TK基因阳离子脂质体转染效率.将对数生长期C6细胞接种于96孔板,依据转染效率实验结果分为GCV组、超声3min+GCV组,超声3 min+GCV组加入9μg阳离子脂质体-HSV-TK基因质粒的100μL培养液,并超声辐照3min,GCV组转染空白阳离子脂质体;转染24h后,2组均分别加入0.1、1、10、50、100、1 000mg/L GCV作用48h,采用分光光度法检测C6细胞存活率.结果 转染48h后,超声1、2、3、4min组C6细胞HSV-TK基因转染效率[(0.14± 0.07)％、(1.39±0.11)％、(19.61±4.80)％、(18.81±7.92)％]均高于脂质体组[(0.05±0.01)％](P＜0.05),且超声3、4min组转染效率高于超声1、2min组,超声2 min组转染效率高于超声1 min组(P＜0.05),超声3 min组与超声4min组转染效率比较差异无统计学意义(P＞0.05);随GCV浓度增加,GCV组和超声3min+GCV组C6细胞存活率均逐渐降低;GCV为50、100、1 000mg/L时,超声3min+GCV组C6细胞存活率[(85.88±1.80)％、(75.51±1.43)％、(68.17±5.26)％]均低于GCV组[(95.40±0.85)％、(92.62±4.50)％、(83.66±0.98)％](P＜0.05);GCV为0.1、1、10mg/L时,超声3min+GCV组C6细胞存活率[(99.32±3.01)％、(97.01±1.53)％、(94.50±1.15)％]与GCV组[(99.56±5.14)％、(98.60±5.18)％、(97.39±8.06)％]比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 聚焦超声体外辐照可明显提高载HSV-TK基因阳离子脂质体转染效率,增强GCV的抗胶质瘤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪国斌	中山大学附属第五医院放射科	73	430	12.0	16.0
2	严飞	中国科学院深圳先进技术研究院	23	54	5.0	6.0
3	李文娟	中山大学附属第五医院放射科	29	78	6.0	8.0
4	张怡	中山大学附属第五医院放射科	7	18	2.0	4.0
5	方义杰	中山大学附属第五医院放射科	13	37	3.0	5.0
6	邓志婷	中国科学院深圳先进技术研究院	2	3	1.0	1.0