转化生长因子-β1 siRNA神经干细胞后期移植对大鼠脊髓损伤修复的影响

• 作者: 张妍 徐长妍 李秋菊 杨利丽 王春玲
• 来源期刊: 中国中西医结合外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脊髓损伤修复 转化生长因子-β1 神经干细胞移植 动物模型
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 613-621
• 页数: 9页
• 分类号: Q95-33|R681.5
• 字数: 6327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6948.2018.05.019

摘要

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)siRNA鼠神经干细胞(NSCs)后期移植对大鼠脊髓损伤修复的影响.方法:TGF-β1 siRNA质粒病毒转染至NSCs,转染时分对照组、转染对照组、转染组共3组,Western blot检测NSCs被转染后TGF-β1蛋白的表达.选取成年雌性SD大鼠78只,建立大鼠急性脊髓损伤模型,随机分为对照组,NSCs移植组及TGF-β1-siRNA组.通过BBB评分、斜板试验、改良的Tarlov评分进行运动功能评定.造摸后1周通过RT-PCR、Western blot检测脊髓损伤区周围突触素及TGF-β1基因转录和蛋白的表达.造模后4周,HE染色及荧光显微镜观测CM-Dil标记的NSCs存活及分布情况,HRP逆行示踪评估神经纤维再生情况,透射电镜观察各组脊髓损伤区超微结构改变.结果:Western blot检测显示TGF-β1低表达可持续14 d.造模后1周起,大鼠下肢运动功能评价TGF-β1-siRNA组优于NSCs移植组,NSCs移植组优于对照组.HE染色NSCs移植组损伤区脊髓空洞较小,TGF-β1-siRNA组脊髓空洞几乎消失,对照组可见脊髓组织缺失及脊髓空洞形成.TGF-β1-siRNA组TGF-β1 mRNA表达为5.33±0.24,较对照组(10.47±0.54)和NSCs移植组(8.06±0.36)显著降低(P<0.05),突触素的表达为11.36±0.28,明显高于NSCs移植组(8.27±0.33)及对照组(5.04±0.30);移植后4周,对照组HRP阳性神经纤维数(48.66±8.94个/高倍视野)和CM-Dil阳性细胞(0±0.00个/高倍视野)最少,TGF-β1-siRNA组最多,分别为(162.46±16.65个/高倍视野)、(38.68±4.89个/高倍视野),NSCs移植组次之,分别为(85.86±11.24个/高倍视野)、(22.38±3.45个/高倍视野).在透射电镜观察下,TGF-β1-siRNA组大鼠脊髓组织损伤区可见大量有髓神经纤维及无髓神经纤维,轴突数量较多,再生轴突髓鞘完整;NSCs移植组可见较多有髓神经纤维及无髓神经纤维;对照组损伤区可见胶质瘢痕和少量有髓神经纤维,坏死的有髓神经纤维.结论:TGF-β1 siRNA神经干细胞能有效降低脊髓损伤区TGF-β1表达,促进突触素表达,可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,改善大鼠肢体运动功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐长妍	吉林大学第一医院医务部	68	567	14.0	21.0
2	张妍	吉林大学第二医院脊柱外科	64	234	8.0	12.0
3	杨利丽	吉林大学第二医院脊柱外科	26	97	5.0	9.0
4	李秋菊	吉林大学第二医院创伤骨科	47	160	8.0	11.0
5	王春玲	吉林大学中日联谊医院神经内科	5	9	2.0	3.0