微小RNA-375通过靶向PAX6对宫颈癌HeLa细胞顺铂敏感性的影响

• 作者: 水丽君 蒋莉莎 邓敏 陆义红
• 来源期刊: 临床肿瘤学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌 微小RNA-375 增殖 顺铂耐药 人类配对盒基因6
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 501-507
• 页数: 7页
• 分类号: R737.33
• 字数: 5254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0460.2018.06.004

摘要

目的 探讨微小RNA-375 (miR-375)和人类配对盒基因6(PAX6)在宫颈癌顺铂耐药株HeLa cisR中的表达及耐药逆转作用并初步探讨可能机制.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测28例正常宫颈组织、30例宫颈癌组织(14例顺铂敏感和16例顺铂不敏感)和不同顺铂敏感性细胞HeLa、HeLa cisR中miR-375、PAX6 mRNA水平,采用脂质体法向HeLa和HeLa cisR细胞转染含miR-375模拟物(mimics)的寡核苷酸探针(过表达组)和阴性对照NC(阴性对照组),以不行任何转染的为空白对照组.采用QPCR检测转染后HeLa和HeLa cisR细胞中miR-375和PAX6 mRNA水平,采用MTI法检测不同浓度顺铂(1、3、10、30、100 μmol/L)处理后的增殖情况并计算半数抑制浓度(IC50)以评价顺铂敏感性,Western blotting检测PAX6蛋白水平,双荧光素酶报告基因试验评价miR-375对PAX6的靶向调控作用.结果 宫颈癌组织中的miR-375水平低于正常宫颈组织(0.714±0.341vs1.006±0.299),PAX6 mRNA水平高于正常宫颈组织(1.855±0.928vs.1.011±0.257),miR-375水平与PAX6 mRNA水平呈负相关(r=-0.416,P＜0.05).与化疗敏感组相比,化疗不敏感组的miR-375水平降低,而PAX6 mRNA水平升高(P＜0.05).HeLa cisR细胞的miR-375水平低于HeLa细胞(0.365±0.098vs.1.032±0.135),而PAX6mRNA水平高于HeLa细胞(3.154±0.957vs.1.067±0.168),差异均有统计学意义(P＜0.05).与其余两组相比,过表达组转染后的miR-375水平升高,PAX6蛋白和mRNA水平均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-375过表达可降低顺铂IC50(P＜0.05),先转染miR-375 mimics 24 h后再转染过表达PAX6的pCMV-PAX6质粒后细胞的IC50与未转染细胞的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-375通过靶向PAX6参与了宫颈癌细胞的顺铂耐药,miR-375有望成为逆转宫颈癌顺铂耐药的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋莉莎	合肥安徽医科大学第二附属医院妇产科	2	1	1.0	1.0
2	陆义红	合肥安徽医科大学第二附属医院妇产科	2	1	1.0	1.0
3	水丽君	合肥安徽医科大学第二附属医院妇产科	1	1	1.0	1.0