子房注射法转化‘紫宝石’蝴蝶兰的研究

• 作者: 吴坤林 张莉 房林 曾宋君 李琳 王佳 郑枫
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: ‘紫宝石’蝴蝶兰 子房注射法 遗传转化 PCR
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 作物栽培与营养、遗传育种
• 页码范围: 669-674
• 页数: 6页
• 分类号: S682
• 字数: 5368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.04.009

摘要

采用子房注射法对‘紫宝石’蝴蝶兰进行外源DNA导入研究,结果表明:不同时期注射和不同注射处理方式对‘紫宝石’蝴蝶兰的落果率影响不同,对胚座组织和种子的GUS染色率的影响也不同,在授粉后65 d时,以2％ DMSO为缓冲液,注射400μg/mL浓度质粒,种子的GUS染色率最高达6.14％.选取各注射时期无菌播种后获得的1 000个原球茎,经系列浓度的潮霉素筛选,结果发现授粉后65 d注射时获得的抗性植株最多,为31株,转化率为3.1％.切取转化植株幼叶及幼根进行GUS检测,均为阳性;随机挑选7株幼苗进行PCR检测,均能扩增出GUS基因和HPT基因条带,说明外源基因已经整合到植株的基因组内.此研究为兰科植物育种提供了一种简单高效的途径.