大头金蝇β-actin基因克隆与多克隆抗体制备

• 作者: 张古忍 张敏
• 来源期刊: 环境昆虫学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大头金蝇 β-actin 基因克隆 抗原多肽 Western Blot
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 180-186
• 页数: 7页
• 分类号: Q963|S43
• 字数: 5334字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0858.2018.01.23

摘要

为深入研究大头金蝇Chrysomya megacephala (Fabricius)关键功能基因的表达调控,运用RT-PCR和RACE技术,克隆获得大头金蝇β-actin基因cDNA全长序列(GenBank登录号为KC207081),并对其进行生物信息学分析.大头金蝇β-actin基因cDNA全长1 355 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 131 bp,编码376个氨基酸,5'UTR长度为87 bp,3'UTR约为110 bp.ORF编码的蛋白质分子量为41.8 kD,等电点5.286,氨基酸序列与其他昆虫β-actin一致性高达97％-99％,且含有由6个β-actin蛋白家族特有的保守模式(motif)所构成的指纹.根据对β-actin氨基酸序列的亲水性、抗原性和表面可及性分析预测,设计并合成β-actin抗原多肽(Cys-GPYARVKRHQKGLKT),免疫新西兰兔获得多克隆抗体,其效价远高于1∶64 000.采用Western Blot技术检测大头金蝇各发育阶段的β-actin蛋白表达,结果表明β-actin表达恒定.本文的研究结果为大头金蝇功能基因的深入研究提供了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张敏	南华大学生物化学与分子生物学教研室	71	347	10.0	17.0
3	张古忍	中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室	46	896	15.0	29.0