野黄芩苷对苯并芘致人胚肺成纤维细胞DNA损伤的保护作用

• 作者: 刘丹 刘静 夭建华 张继虹 彭雷 罗瑛 高茜
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 野黄芩苷 苯并芘 人胚肺成纤维细胞 DNA损伤
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 分类号: R349.7
• 字数: 4531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2018.01.006

摘要

目的 探讨野黄芩苷对苯并芘(benzo[a]pyrene, B(a)P)诱导的DNA损伤的保护作用.方法 ① 采用稳定转染抑癌基因p53-GFP质粒的p53 -/ -MEF细胞(p53-GFP细胞)筛选野黄芩苷等小分子化合物对p53启动子的激活情况;② 将MRC-5细胞分为DMSO对照组,B(a)P处理组,B(a)P和野黄芩苷共处理组,用Western印迹检测不同处理组MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX的蛋白表达情况.③ 将MRC-5细胞分为DMSO对照组,B(a)P处理组,B(a)P和野黄芩苷共处理组,Western印迹检测不同处理组MRC-5细胞中凋亡相关蛋白PARP的变化.结果 荧光结果显示,10 μmol/L的B(a)P能够明显激活p53-GFP荧光,其中野黄芩苷和B(a)P共处理后荧光表达被明显抑制;用Western印迹检测发现,与DMSO对照组相比,B(a)P处理的MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX的蛋白表达增加, PARP的切割增强,而野黄芩苷和B(a)P共处理的MRC-5细胞中p-p53(Ser15)和γH2AX蛋白表达水平较B(a)P处理组明显降低,同时PARP的切割明显减弱,并且具有浓度依赖性.结论 本研究采用稳定转染p53-GFP质粒的p53 -/ -MEF细胞初步观察到野黄芩苷可能对苯并芘诱导的DNA损伤具有保护作用.在MRC-5细胞中的进一步研究证明,野黄芩苷与 B(a)P 共处理能降低 MRC-5中 p-p53(Ser15)和γH2AX的表达水平,同时能降低凋亡相关蛋白的表达,提示野黄芩苷对苯并芘致MRC-5细胞DNA损伤具有保护作用,其机制可能与抑制DNA损伤和凋亡通路有关.