三疣梭子蟹PtToll-1受体的原核表达及组织、细胞分布研究

• 作者: 刘顺 周素明 张丹枫 张鑫 杨宁 王国良
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 三疣梭子蟹 Toll受体 胞外结构域 原核表达 组织分布 真核表达 细胞定位
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 页码范围: 300-306
• 页数: 7页
• 分类号: Q344+.1
• 字数: 5217字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2018.038

摘要

为深入研究三疣梭子蟹Toll受体的功能,在前期工作的基础上构建了PtToll-1胞外结构域原核表达载体,并成功获得其重组蛋白.将获得的重组蛋白免疫小鼠获得抗此重组蛋白免疫抗血清用于后续研究.SDS-PAGE结果表明,体外诱导表达重组蛋白rPt Toll-1以包涵体的形式出现在大肠杆菌裂解液的沉淀中,分子量大小约为87.18 kD;Western-Blot分析表明,小鼠抗血清能与rPt Toll-1特异性结合.利用免疫荧光及细胞免疫化学方法对三疣梭子蟹PtToll-1在消化道、肝胰腺、鳃、心脏和肌肉等组织及血淋巴细胞中的分布进行研究.此外成功构建PtToll-1完整蛋白的真核表达载体pEGFP-N2-Pt Toll-1,并转染HEK293T细胞研究其在哺乳动物细胞HEK293中的表达.组织免疫荧光结果显示,Pt Toll-1在三疣梭子蟹消化道、肝胰腺、鳃、心脏及肌肉等组织中均有分布,但在鳃及消化道的组织结构中表达较强;细胞免疫荧光及免疫化学结果均表明Pt Toll-1主要分布在血淋巴的细胞膜上;激光共聚焦显微技术观察发现,pEGFP-PtToll-1融合蛋白也主要在HEK-293T细胞膜上表达.研究结果将为三疣梭子蟹Toll受体蛋白的免疫学功能的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨宁	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	16	115	6.0	10.0
3	王国良	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	143	2150	27.0	39.0
4	刘顺	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	5	20	3.0	4.0
7	张鑫	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	40	69	5.0	5.0
8	周素明	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	12	43	4.0	6.0
9	张丹枫	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	2	8	1.0	2.0