树鼩IgE高亲和力受体α亚基单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 寸韡 张晶晶 李智华 浦滔 肖红剑 龙琼
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 树鼩 IgE高亲和力受体α亚基 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 748-751
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R392.1
• 字数: 2315字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2018.06.005

摘要

目的:制备抗树鼩IgE高亲和力受体α亚基(FcεRIα)的单克隆抗体,并对其免疫学特性进行检测.方法:采用大肠杆菌原核表达树鼩IgE FcεRIα蛋白,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合;通过ELISA法和有限稀释法筛选杂交瘤细胞;利用Protein A纯化单克隆抗体,Western印迹检测其特异性,间接免疫荧光及免疫组化对单克隆抗体进行分析.结果:用纯化的树鼩IgE FCεRIα蛋白免疫小鼠,选取效价高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,经过3轮亚克隆筛选,筛选出5株抗树鼩IgE FCεRIα单克隆抗体,分别命名为HC020、HC021、HC022、HC023和HC024,细胞间接免疫荧光表明5株单克隆抗体均能检测到293T细胞中表达的IgE FCεRIα,其中HC020、HC022、HC024能够通过免疫组化检测组织切片中的IgE FCεRIα.结论:制备了5株IgE FCεRIα单克隆抗体,为今后研究树鼩IgE FCεRIα奠定了基础.