人巨细胞病毒临床病毒株UL148基因的体外表达及功能位点预测

• 作者: 丁俊彩 伍苑宾 王波 胡兢晶 苏海浩 蔡丽君 谢斌华 谭琪琪 郭媛媛 郭梦杰
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 人巨细胞病毒 临床病毒株 UL148 信号转导
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 94-97
• 页数: 4页
• 字数: 3204字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2018.02.003

摘要

目的 体外获得人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)临床病毒株 UL148 RNA及探讨其基因功能.方法 将感染HCMV的新生儿尿液接种人胚肺细胞,分离HCMV临床病毒株,并经多重PCR鉴定.扩增UL148基因,经双酶切后克隆入pGEM-T-Easy质粒,构建重组质粒,并置于T7启动子下游,经重组质粒、PCR产物、双酶切产物电泳鉴定及序列测定.克隆成功的质粒以32P标记,进行体外转录RNA.根据UL148序列特征应用生物信息学分析其翻译后修饰位点.结果 成功在体外获得HCMV临床病毒株,经电泳及序列测定证实重组质粒构建成功,在T7 RNA聚合酶作用下,体外获得UL148 RNA.翻译后修饰位点显示UL148基因存在1个与细胞黏附相关的特征序列,1个豆荚外源凝集素β-链标记位点、2个N-豆蔻酰化位点,1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点,7个蛋白激酶C磷酸化位点,1个cAMP/cGMP-依赖性蛋白激酶磷酸化位点和2个N-糖基化位点,1个跨膜区域.结论 UL148基因编码产物可能为一个病毒黏附分子,参与宿主细胞的信号转导作用.