鸭肠炎病毒强毒和疫苗弱毒鉴别诊断PCR方法的建立

• 作者: 万春和 傅光华 傅秋玲 刘荣昌 施少华 程龙飞 陈红梅 陈翠腾 黄瑜
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭肠炎病毒 强毒 疫苗弱毒 UL2基因 PCR 鉴别诊断
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 219-224
• 页数: 6页
• 分类号: S858.32
• 字数: 4154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2018.03.001

摘要

为建立鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)强毒和疫苗弱毒的鉴别诊断方法,通过分析比较GenBank数据库中上传的DEV强毒株和疫苗弱毒株UL2基因核苷酸序列,分析DEV疫苗弱毒和DEV强毒在UL2基因上的核苷酸序列,利用引物设计软件Oligo 7.0,设计一组可对DEV强毒株和疫苗弱毒株UL2基因进行编码区全长扩增的特异性引物,经条件优化后建立DEV强毒和疫苗弱毒鉴别诊断的PCR方法.结果表明,DEV疫苗弱毒和DEV强毒在UL2基因上存在528 bp的连续核苷酸序列缺失.优化后的PCR方法最佳退火温度为55 C,对DEV强毒和疫苗弱毒扩增片段大小分别为1019 bp和491 bp;敏感性强,最低检测限为15.3 pg;特异性好,对鸭源常见传染病(如番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鹅细小病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌)均无特异性扩增.