人类白细胞抗原-G阳性的脐带间充质干细胞体外诱导调节性T细胞的实验研究

• 作者: 刘鸿 孔祥瑞 林大勇 毕丽丽 白剑 石炳毅 肖漓 苗兰英 陈文 高钰 黄海燕
• 来源期刊: 器官移植
• 学科: 医学
• 关键词: 人类白细胞抗原(HLA)-G 脐带间充质干细胞 T细胞 调节性T细胞(Treg) 转染 修饰 免疫排斥 免疫耐受 CD4+T细胞
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 97-102
• 页数: 6页
• 分类号: R392.4
• 字数: 4102字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7445.2018.02.002

摘要

目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)-G阳性的脐带间充质干细胞在体外诱导调节性T细胞(Treg)产生的效果.方法 从新生儿脐带中分离脐带间充质干细胞,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到脐带间充质干细胞中,设为PEGFP-N1-HLA-G组;转染空载体PEGFP-N1质粒的脐带间充质干细胞设为PEGFP-N1组;相同条件下,未加入空载体的脐带间充质干细胞设为空白对照组.采用流式细胞仪检测脐带间充质干细胞标志物;采用蛋白质免疫印迹法鉴定各组细胞HLA-G蛋白的表达;各组细胞与健康人外周血中CD4+T细胞混合培养24 h和48 h后,采用流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的比例.结果 脐带间充质干细胞CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达;PEGFP-N1-HLA-G组可以表达HLA-G蛋白,与空白对照组和PEGFP-N1组比较差异均有统计学意义(均为P<0.01).PEGFP-N1-HLA-G组细胞在与CD4+T细胞混合培养24 h后,CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的(15.3±1.9)%,在培养48 h后,CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的(14.3±2.1)%,与空白对照组和PEGFP-N1组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 HLA-G基因修饰后脐带间充质干细胞能够有效地在体外诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg的产生.