农杆菌介导的无籽基因转化诺丽根段

• 作者: 刘娟 吴田 杨自云 蓝增全
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 农杆菌侵染 诺丽 抗性芽 遗传转化 无籽基因
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 开发与应用
• 页码范围: 473-477,466
• 页数: 6页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2018.05.0082

摘要

[目的]为获得无籽诺丽植株.[方法]实验利用含有无籽基因的农杆菌对诺丽根段进行遗传转化,诺丽根段经预培养3d、农杆菌液侵染20 min、共培养基暗培养3d、筛选培养20 d后得到抗性芽,继代筛选后得到转化子;通过提取诺丽转化子叶片的DNA,以NptⅡ为引物进行PCR检测;将阳性植株进行生根培养后,炼苗并移栽至营养钵,观察其生长状况.[结果]表明:诺丽根段经过筛选培养后,获得225株抗性芽,抗性芽平均分化率为56.25％;抗性芽继代筛选培养后得到94株转化子,对其进行PCR检测,获得18株转基因阳性植株;移栽后,能正常生根且于营养钵中正常生长.[结论]经PCR初步鉴定,无籽基因成功导入诺丽植株中,转化率为8％.