三角梅4,5-多巴双加氧酶基因的克隆与表达分析

• 作者: 刘姗 孙蓉 曹燕亭 解智杰 陈怡 陈惠 黄林
• 来源期刊: 分子植物育种
• 关键词: 三角梅 4,5-多巴双加氧酶 克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基因组学及功能基因
• 页码范围: 54-60
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13271/j.mpb.016.000054

摘要

本研究通过同源克隆技术对三角梅(Bougainvillea glabra Choisy)甜菜色素合成途径中4,5-多巴双加氧酶(4,5-DOPA dioxygenase,DOD)基因进行了克隆分析.随后将获得的三角梅DOD基因克隆到表达载体pET30b(+)上,构建原核表达载体pET30b (+)-DOD,并转入大肠杆菌Rosetta (DE3)进行诱导表达.同时结合实时荧光定量PCR技术分析了遮光处理对三角梅DOD表达量和甜菜红素含量的影响.结果表明,三角梅DOD基因的cDNA序列长度为804 bp,编码268个氨基酸,GenBank登录号为KY676801.系统进化树分析显示该DOD与叶子花(Bougainvillea spectabilis Willd.)和紫茉莉(Mirabilis jalapa L.) DOD亲缘关系比较近;原核表达得到约37kD的目的蛋白,这与预测结果相符合;实时荧光定量PCR结果表明,遮光处理使DOD表达量降低;同时,甜菜红素含量也表现为下降.这些研究结果为解析三角梅甜菜色素合成途径提供了理论依据,为三角梅花色形成机制的研究提供了基础资料.