毕赤酵母重组菌高密度发酵产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶

• 作者: Dumba Trish 于林凯 冯凤琴 张婷 张辉 李杨 来佳 蔡海莺 赵敏洁
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶 高密度发酵 毕赤酵母 重组表达 共诱导
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 加工技术
• 页码范围: 99-107
• 页数: 9页
• 字数: 7124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2018.07.013

摘要

疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶TLL是一种热稳定、具有位置专一性等良好属性和应用前景的脂肪酶,已成功在多种宿主中实现重组表达.本研究构建含前导肽的TLL脂肪酶毕赤酵母重组工程菌,在摇瓶水平对该重组工程菌的培养和诱导条件进行优化,通过单因素试验,得到的最佳发酵条件:1.5％(体积分数)甲醇,pH 7.0,质量分数0.5％玉米油和0.1％阿拉伯胶,该条件下摇瓶发酵最高酶活为2 265.3 U/mL.以甲醇为唯一碳源进行高密度发酵,202 h后菌体OD600值达到最高282,对应发酵上清液的最高酶活为22 561.4 U/mL.参考摇瓶优化结果,采用辅助碳源与甲醇共诱导高密度发酵,培养和诱导208 h后,最终菌体OD600值达到362,对应发酵上清液的最高酶活为24 522.6 U/mL,较以甲醇为唯一碳源的对应值分别提高了28.37％和10.87％.另外,最高酶活较摇瓶水平发酵的最高酶活2 265.3 U/mL提高10.83倍,表明高密度发酵和共诱导是大幅提高酵母表达重组TLL蛋白的重要手段.