PRRSV非结构蛋白Nsp2PL2域结构及其去泛素化酶功能

• 作者: 刘贤明 张丽琳 张蕾 洪文姣 芦冬 苏彦鑫 赵成雪 黄金海 黎瑞巧
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV) PL2域 蛋白结晶 去泛素化
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 动物病毒研究论著
• 页码范围: 533-540
• 页数: 8页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

为了解PRRSV非结构蛋白Nsp2的PL2域结构及功能,本研究通过构建PL2、PL2融合Ub的Strep标签的原核表达质粒,表达获得纯度95％以上的蛋白,进行结晶.结果表明PRRSV PL2蛋白的聚集状态具有浓度依赖性,优化出短粗和长细两种晶型的蛋白晶体.通过细胞内外实验了解PL2的去泛素化酶特征.将纯化的Ub-PL2-Strep蛋白分别与K48、K63或KO(线性)泛素化的蛋白孵育,检测蛋白体外去泛素化酶活性;将构建的PL2真核表达载体与不同位点泛素质粒共转染以了解PL2去泛素化酶活性及作用模式.结果表明PL2蛋白具有去除K48、K63及线性泛素化修饰的广谱去泛素化酶作用.PL2蛋白高二硫键含量,多聚特性影响规则晶体及衍射图的形成.PL2蛋白结构及功能的研究为PRRSV致病机制及药物靶点的筛选提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张蕾		26	246	7.0	15.0
2	黄金海		31	164	7.0	12.0
3	张丽琳		6	14	2.0	3.0
4	芦冬		2	0	0.0	0.0
5	黎瑞巧		2	1	1.0	1.0
6	洪文姣		1	0	0.0	0.0
7	苏彦鑫		1	0	0.0	0.0
8	赵成雪		1	0	0.0	0.0
9	刘贤明		1	0	0.0	0.0