小反刍兽疫病毒非结构蛋白C的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 俞赵荣 崔佣楸 张谦 李永东 杨侃侃 王元红 王勇 苏莉 钟灵毓
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 非结构蛋白C 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 页码范围: 65-69
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2018.02.011

摘要

采用RT-PCR技术从小反刍兽疫病毒(PPRV)中扩增出C基因.将C基因亚克隆至原核表达载体pGEX 6P 1中,构建出重组表达质粒pGEX-6P 1 PPRV C.将重组质粒转化Rosetta感受态细胞后,经IPTG诱导表达目的蛋白.表达出的重组蛋白经SDS-PAGE和Western-blot鉴定正确后,免疫6周龄BALB/c雌鼠,制备多克隆抗体血清.结果表明:C蛋白在大肠埃希菌中主要以包涵体的形式表达,分子量大小约为42 ku;Western-blot结果表明重组C蛋白具有良好的反应原性;琼脂扩散试验结果表明制备的抗C蛋白多抗血清效价为1∶2.这一研究成功克隆出C基因,制备出多克隆抗体血清,为今后进一步深入研究C蛋白的功能提供了生物材料.