基于立即早期蛋白IE62建立水痘-带状疱疹病毒感染性滴度检测方法

• 作者: 付文锟 叶江辉 夏宁邵 朱桦 潘德全 王玮 程通 蔡琳俐
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 水痘-带状疱疹病毒 感染性滴度检测方法 立即早期蛋白62 单克隆抗体 酶联免疫斑点技术
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1843-1848
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12|R511.5
• 字数: 4569字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2018.12.017

摘要

目的:基于水痘-带状疱疹病毒(VZV)立即早期蛋白IE62与酶联免疫斑点检测技术(ELISpot)建立一种新型的VZV感染性滴度的快速检测方法.方法:应用生物信息学方法设计并合成VZV-IE62蛋白的多肽抗原,牛血清白蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠,筛选和制备抗VZV-IE62单克隆抗体,应用Western blot和免疫荧光法等开展抗体性能评价,继而应用酶联免疫斑点技术(ELISpot)结合生物素-亲和素放大法建立新型的VZV感染性滴度检测方法,并与经典空斑计数法进行比较.结果:获得抗VZV-IE62的单克隆抗体1B7,应用于ELISpot方法可特异识别VZV感染后的细胞,以之为基础建立了新型的VZV感染性滴度检测方法.相比经典空斑计数法,该方法可显著缩短检测时间(从5至7d缩短至32 h)检测结果具有较好的一致性.结论:本研究建立了一种新型的基于VZV立即早期蛋白IE62与酶联免疫斑点技术的VZV感染性滴度检测方法(VZV-IE62 ELISpot),具有潜在的转化应用前景,可为VZV的防治研究提供支持.