自噬在乌头碱诱导H9C2心肌细胞凋亡中的作用及机制研究

• 作者: 唐欣 彭成 文欢 胡婷婷 谢晓芳 饶朝龙
• 来源期刊: 中药材
• 学科: 医学
• 关键词: 乌头碱 H9C2心肌细胞 毒性 自噬 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 1191-1196
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2018.05.039

摘要

目的:观察自噬在乌头碱诱导H9C2心肌细胞凋亡中的作用,并对其作用机制进行初步探讨.方法:以0.05％、0.1％、0.2％、0.4％浓度的乌头碱分别对H9C2心肌细胞作用30、60、90、180 min,采用MTT法测定乌头碱对H9C2心肌细胞的增殖抑制作用;0.05％乌头碱作用H9C2心肌细胞不同时间后,应用MDC荧光染色观察自噬的发生,Hoechst 33342/PI荧光双染观察凋亡的发生;并通过Western blot法检测自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1和凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的变化.结果:乌头碱对H9C2心肌细胞增殖有显著的抑制作用,且该作用呈时间及浓度依赖性;MDC荧光染色和Hoechst 33342/PI双染检测结果显示乌头碱给药后可诱导H9C2心肌细胞发生自噬和凋亡;Western blot检测结果显示,自噬特异性蛋白LC3B和Beclin-1被激活,凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达升高.用3-MA抑制自噬后,可下调LC3B、Beclin-1、Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达.结论:乌头碱能抑制H9C2心肌细胞的生长,并诱导其发生自噬和凋亡,此过程中自噬和凋亡可能为拮抗作用,3-MA特异性抑制自噬后可增加乌头碱诱导的H9C2心肌细胞凋亡.