Sfrp5/Dkk4基因在ETU诱导大鼠胚胎肛门直肠畸形中表达的初步研究

• 作者: 杨中华 王维林 白玉作 耿园园 贾慧敏 高红
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 关键词: 大鼠 先天性肛门直肠畸形 胚胎发育 基因表达
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 肛肠畸形专题
• 页码范围: 909-913
• 页数: 5页
• 字数: 4331字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2018.12.007

摘要

目的 利用分子生物学方法检测肛门直肠畸形(anorectal malformations,ARM)大鼠胚胎发育中Sfrp5/Dkk4基因的表达.方法 对Wistar孕鼠进行乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU)致畸,制作ARM动物模型;分别在孕15 d(E15)、17 d(E17)、19 d(E19)和21 d(E21),于ETU-无畸形对照组(NE组)、ETU-ARM畸形组(AE组)和生理盐水对照组(NS组)中各选取6只胎鼠末端直肠组织,采用蛋白印迹(Western blot)和实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测Sfrp5/Dkk4的表达,并对其表达进行定量与比较分析.结果 Western blot结果显示在E15、E17、E19和E21时,Sfrp5在NE组蛋白表达量分别为63.55±0.35、24.51±0.41、13.28±0.09和49.67±0.12;在AE组分别为21.43±0.18、59.57±0.44、61.23±0.47和32.73±0.51;在NS组分别为52.17±1.08、23.66±0.87、16.21±1.33和50.01±2.03.Dkk4在NE组蛋白表达量分别为20.07±0.09、47.15±0.15、39.88±0.37和13.75±0.47;在AE组分别为54.27±0.61、19.43±0.25、21.09±0.17和57.53±0.49;在NS组分别为23.11±0.15、45.89±0.67、41.44±0.37和17.57±1.99.提示NE组、NS组Sfrp5/Dkk4与AE组E17和E19蛋白表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而NE组与NS组在4个时间点比较,差异均无统计学意义(P>0.05).qRT-PCR结果显示在E17和E19时,Sfrp5在AE组中mRNA高表达,其表达量分别是NE组的1.63倍和1.77倍(P=0.049、0.022)、NS组的2.68倍和3.29倍(P=0.041、0.034);Dkk4在AE组中mRNA高表达,其表达量是NE组的1.75倍和1.87倍(P=0.045、0.024)、NS组的2.04倍和1.36倍(P=0.004、0.028).结论 Sfrp5/Dkk4蛋白与mRNA在胚胎发育过程E17和E19中出现异常表达,可能是导致ARM发病的因素.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王维林	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	138	536	11.0	14.0
2	白玉作	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	60	190	8.0	10.0
3	高红	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	136	641	12.0	17.0
4	杨中华	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	12	42	4.0	6.0
5	贾慧敏	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	37	153	7.0	10.0
6	耿园园	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	3	1	1.0	1.0