哈维弧菌rbsB基因的克隆与表达

• 作者: 冯娟 刘广锋 徐力文 王雨 苏友禄 贝蕾 赵超 郭志勋
• 来源期刊: 南方水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 哈维弧菌 rbsB基因 全长克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 75-82
• 页数: 8页
• 分类号: S917.1
• 字数: 5917字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.02.010

摘要

哈维弧菌(Vibrio harveyi)是海水鱼养殖中一种重要的病原菌.该研究根据已知rbsB (核糖体结合蛋白)基因序列设计引物,扩增得到哈维弧菌354(V.harveyi 354)rbsB基因的全序列(GenBank序列号MF797015),预测该序列可编码292个氨基酸,分子量为30.7 kD,理论等电点为5.05,亲水性系数为0.043,为疏水性蛋白.根据RbsB氨基酸构建的系统进化树可以发现哈维弧菌RbsB蛋白和欧文弧菌(V.owensii CAIM 1854)的关系最近.构建了pGEX-4t-1-rbsB重组质粒并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,得到的重组蛋白的相对分子量约59 kD,在37℃、IPTG浓度为0.6 mmol·L–1诱导8 h时表达量最高.