小鼠腹腔及骨髓源性肥大细胞的培养与鉴定

• 作者: 唐慧 徐金华 朱奕锜 沈燕芸 王朵勤 邵亦心
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 肥大细胞 骨髓祖代细胞 诱导多能干细胞 小鼠 细胞,培养的 白细胞介素3 干细胞因子
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 575-579
• 页数: 5页
• 字数: 4325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.08.004

摘要

目的 探讨小鼠腹腔及骨髓源性高纯度肥大细胞体外诱导培养方法,并鉴定其功能.方法 分别从小鼠腹腔灌洗液及股骨获得腹腔及骨髓细胞,用白细胞介素3和干细胞因子分别联合诱导培养2周及4周,光镜下观察细胞形态,甲苯胺蓝染色鉴定肥大细胞成熟度,流式细胞仪检测细胞表面分子CD117和FceR Ⅰ α的表达情况,不同浓度Compound48/80刺激后镜下计数肥大细胞脱颗粒率,分光光度法测定肥大细胞β己糖胺酶释放率.结果 分别诱导培养2周及4周后,小鼠腹腔及骨髓细胞呈大小均一且具折光性的悬浮细胞.甲苯胺蓝染色示上述两种细胞胞质内含紫红色的异染颗粒.两种细胞表面CD117及FcεR Ⅰ α单阳性率均高于95％,双阳性率分别为97.68％±0.80％及96.12％±0.76％.100和1 000 mg/L Compound48/80刺激组与空白对照组肥大细胞相比,脱颗粒率差异有统计学意义(均P＜ 0.01).100 mg/L Compound48/80组骨髓源性肥大细胞以及10 mg/L、100 mg/LCompound48/80组腹腔源性肥大细胞β己糖胺酶释放率均较空白对照组显著升高(P＜ 0.01或0.05).结论 白细胞介素3和干细胞因子联合可诱导小鼠骨髓干细胞及腹腔细胞定向分化增殖,从而获得高纯度成熟且具有脱颗粒功能的肥大细胞,为后续细胞生物学研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐金华	复旦大学附属华山医院皮肤科	145	538	11.0	16.0
2	王朵勤	复旦大学附属华山医院皮肤科	18	93	6.0	9.0
3	唐慧	复旦大学附属华山医院皮肤科	26	107	6.0	10.0
4	沈燕芸	复旦大学附属华山医院皮肤科	9	43	4.0	6.0
5	朱奕锜	复旦大学附属华山医院皮肤科	7	9	2.0	3.0
6	邵亦心	复旦大学附属华山医院皮肤科	6	11	2.0	3.0