温泉来源地芽孢杆菌耐热α-淀粉酶基因的克隆表达及酶学性质研究

• 作者: 叶秀云 林云 林娟 林梦丹 王国增
• 来源期刊: 福州大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 地芽孢杆菌 α-淀粉酶 克隆 表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 页码范围: 143-150
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 字数: 5257字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7631/issn.1000-2243.16346

摘要

以Geobacillus sp.WQJ-1基因组DNA为模板,利用PCR扩增获得成熟α-淀粉酶基因amyWQJ,构建重组质粒pET-28a(+)-amyWQJ,转化大肠杆菌BL21 (DE3)诱导表达.用镍柱亲和层析对粗酶液进行分离纯化,获得相对分子质量约为59 ku的重组酶rAmyWQJ.研究表明,该酶最适pH值为6.0,具有较好pH稳定性,最适温度为70℃;Ca2+能提高该酶的热稳定性;Hg2+、EDTA、SDS、Cr”、Mn2+、Cu2+和pb2+对该酶活力具有不同程度的抑制作用,而Co2+、Na+和β-Mercaptoethanol则具有促进作用.以可溶性淀粉为底物,该酶动力学参数Km为6.62 mg·mL-1,vmax为2 197.80 μmol·(mg·min)-1;降解最适作用底物木薯淀粉的终产物为寡聚糖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林娟	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	110	610	12.0	18.0
2	叶秀云	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	92	537	11.0	17.0
3	王国增	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	11	57	5.0	7.0
4	林梦丹	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	2	9	2.0	2.0
5	林云	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	6	7	2.0	2.0