用Golden Gate法构建广谱抗番木瓜环斑病毒海南株系的CRISPR/FnCas9植物表达载体

• 作者: 孔华 王绪朋 贾瑞宗 赵辉 郭安平 郭运玲
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番木瓜 CRISPR 番木瓜环斑病毒 广谱抗病 基因组编辑
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 植物病理、作物病虫害及其防治
• 页码范围: 955-962
• 页数: 8页
• 分类号: S668.2
• 字数: 5942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.05.019

摘要

分子生物学育种是目前防治番木瓜环斑病毒(PRSV)最有效的方法.早期转基因番木瓜抗病毒的策略是根据“致病菌衍生的抗病性”(PDR)原理,将病毒来源的基因全长序列,转入番木瓜并获得抗性.PDR策略最主要特点依赖于靶目标病毒基因序列相似性,不能有效解决海南的番木瓜环斑病毒遗传多样性复杂的株系.本研究着眼于创制广谱的抗PRSV新策略,用最新的CRISPR/FnCas9基因编辑技术和Golden Gate载体构建系统,依据不同PRSV株系的保守序列分析结果,将5个sgRNA(2个CP sgRNA,2个Nib sgRNA和1个HC-Pro sgRNA)串联在一个载体上,实现一个载体可识别剪切5个位点,从而达到广谱抗PRSV的效果,应对海南地区PRSV株系复杂的问题.目前载体已经进行了测序验证,并在番木瓜上进行了叶片局部瞬时表达,初步表现出对PRSV的抑制效果,这为获得广谱抗番木瓜环斑病毒的番木瓜品种奠定良好基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔华	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	37	330	9.0	16.0
2	赵辉	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	20	78	5.0	8.0
3	郭运玲	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	26	164	8.0	11.0
4	贾瑞宗	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	4	1	1.0	1.0
5	王绪朋	海南大学热带农林学院	1	1	1.0	1.0