定量检测绿色荧光蛋白-轻链蛋白3转基因小鼠角质形成细胞自噬水平

• 作者: Erwin Tschachler Florian Gruber Heidemarie Rossite Leopold Eckhart Michael Mildner 赵邑 金婷婷
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 自噬 角蛋白细胞 绿色荧光蛋白质类 显微镜检查,共焦 图像处理,计算机辅助
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 182-185
• 页数: 4页
• 字数: 3589字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.03.004

摘要

目的 探索一种高通量定量检测细胞自噬小体数量的方法.方法 将绿色荧光蛋白-轻链蛋白3(GFP-LC3)转基因小鼠的角质形成细胞分为对照组(不接受照射或饥饿处理)、饥饿组(给予饥饿处理)、20 J/cm2长波紫外线(UVA)照射组和40 J/cm2 UVA照射组.处理后6h,将细胞固定后在共聚焦显微镜下采集图片.用ImageJ软件编辑宏指令对细胞内GFP-LC3绿色荧光点及细胞进行自动计数,并比较不同组间自噬水平.结果 利用ImageJ软件编辑的宏指令可以成功识别并计数荧光图片中的自噬小体.在测试计算机上分析一张420万像素的图片仅需不到0.6 s.饥饿组、20 J/cm2UVA照射组和40 J/cm2 UVA照射组平均自噬小体数量高于对照组,未加胃抑素A时各组间比较,F=5.01,P＜ 0.05;加入胃抑素A时各组间比较,F=20.05,P＜0.05.该方法可以成功区分饥饿组、UVA照射组和对照组的自噬水平差异.结论 成功为自噬研究提供了一种新的高通量定量检测方法,该方法能够快速准确地检测细胞自噬荧光点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金婷婷	100034北京大学第一医院皮肤性病科	5	3	1.0	1.0
5	Heidemarie Rossite		1	1	1.0	1.0
6	Michael Mildner		1	1	1.0	1.0
7	Florian Gruber		1	1	1.0	1.0
8	Leopold Eckhart		1	1	1.0	1.0
9	Erwin Tschachler		1	1	1.0	1.0
10	赵邑	清华大学附属北京清华长庚医院皮肤科	2	1	1.0	1.0