基于RT-HDA等温扩增技术快捷检测H7N9禽流感病毒的方法研究

• 作者: 余晓 刘琳琳 叶国军 方斌 李翔 江永忠
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: H7N9禽流感病毒 逆转录解旋酶依赖性等温扩增(RT-HDA) 胶体金免疫层析法
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 人类病毒研究论著
• 页码范围: 646-652
• 页数: 7页
• 分类号: R373.1
• 语种: 中文

摘要

常规PCR方法不适宜于实验条件不足的基层现场检测H7N9禽流感病毒,不利于疑似病例的及时诊治.本研究旨在建立一种快速简便、高灵敏度、低成本的H7N9禽流感病毒快速核酸检测技术.选用H7N9禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)基因作为靶标区域设计引物,采用FITC和Biotin标记上下游引物,通过逆转录解旋酶依赖性等温扩增(Reverse transcription helicase-dependent isothermal amplification,RT-HDA)技术扩增病毒RNA,辅以胶体金免疫层析试纸检测核酸扩增产物,建立H7N9禽流感病毒等温扩增检测方法.采用H7N9禽流感病毒质粒和病毒培养物对该方法的灵敏性、特异性和重复性进行评价,结果显示:病毒最低检测限20个拷贝数/μL,与常规PCR方法相比较无明显差异,重复性试验一致,与其他型别的禽流感、流感病毒无交叉反应.本研究建立的RT-HDA联合胶体金免疫层析试纸检测H7N9禽病毒检测方法具有较好的灵敏度、特异性和重复性,特别适用于现场条件下检测H7N9禽流感病毒快速简便的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶国军		20	93	6.0	9.0
2	李翔		15	91	6.0	9.0
3	方斌		20	97	6.0	9.0
4	余晓		10	31	3.0	5.0
5	刘琳琳		21	105	7.0	9.0
6	江永忠		31	104	6.0	9.0