UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究

• 作者: 朱丽臻 朱丽萍 李国强 陈蕾蕾 颜世敢
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 尿道致病性大肠杆菌 KguS/KguR c5032-c5037基因 Red重组系统
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 1113-1117
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 3945字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201801046

摘要

[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC)CFT073株的双组分信号系统KguS/KguR调控的c5032-c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性.[方法]运用Red重组系统将带有c5032-c5037基因同源臂的氯霉素抗性基因取代c5032-c5037基因,在温度敏感型质粒pCP20作用下消除氯霉素抗性基因,构建基因缺失株CFT073Ac5032-c5037,用PCR和基因测序验证基因敲除是否成功,测定有氧和厌氧条件下CFT073 Ac5032-c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中培养不同时间的菌液D600值.[结果]构建了CFT073 Ac5032-c5037,PCR验证及基因测序结果均表明已成功敲除c5032-c5037基因;厌氧条件下CFT073Ac5032-c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中生长比野生型菌株CFT073缓慢,且差异极显著(P＜0.01),但在有氧条件下二者的生长无显著差异.[结论]成功构建了基因缺失株CFT073 Ac5032-c5037,并试验证实KguS/KguR调控的c5032-c5037基因在厌氧条件下参与α-酮戊二酸的利用,为进一步研究KguS/KguR在UPEC中的代谢适应机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈蕾蕾	山东省农业科学院农产品研究所	29	225	9.0	14.0
2	朱丽臻		5	7	2.0	2.0