重组甲型流感病毒基质蛋白1和2通过ERK信号因子诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ

• 作者: 兰露莎 曹慧军 朱颜鑫 江滟 祝洁 罗红
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型流感病毒(IAV) 基质蛋白1(M1) 基质蛋白2(M2) IFN-γ ERK 磷酸化ERK
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 人类病毒研究论著
• 页码范围: 653-660
• 页数: 8页
• 分类号: R373.1
• 语种: 中文

摘要

探讨重组甲型流感病毒基质蛋白1和2(rM1和rM2)通过细胞外信号调节蛋白激酶(Extracellular signal regulated kinase,ERK)诱导小鼠气管上皮细胞产生γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)作用及机制.以原代小鼠气管上皮细胞为实验模型,实验分为6组(rM1组、rM2组、甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)组、rM1+IAV组、rM2+ IAV组和正常对照组).在各组分干预细胞4h、8h、24h时,采用半定量RT-PCR法检测各组细胞中IFN-γmRNA的表达和免疫印迹法检测各组细胞中IFN-γ、ERK、磷酸化ERK (phospho-ERK,p-ERK)蛋白的表达;用抑制剂阻断ERK信号因子信号传导,观察对各组分诱导小鼠气管上皮细胞产生IFN-γ的影响.各组分干预细胞4h、8h、24h,rM1组、rM2组、IAV组、rM1+ IAV组、rM2+ IAV组细胞的IFN-γ mRNA和IFN-γ蛋白表达水平高于正常对照组(P＜0.01或P＜0.05);rM1+ IAV组、rM2+ IAV组细胞的IFN-γ mRNA和IFN-γ蛋白表达水平高于IAV组(P＜0.01或P＜0.05).在干预细胞4h,仅rM2组细胞中ERK磷酸化水平显著高于正常对照组(P＜0.01),在干预细胞8h、24h,rM1组、rM2组、IAV组、rM1+IAV组、rM2+ IAV组细胞中ERK磷酸化水平均显著高于正常对照组(P＜0.01或P＜0.05).加入ERK抑制剂,rM1组、rM2组、rM1+ IAV组、rM2+ IAV组细胞的IFN-γ mRNA和IFN-γ蛋白表达水平显著低于非抑制剂组.本研究数据表明rM1和rM2可通过上调ERK信号因子的磷酸化水平诱导小鼠气管上皮细胞中产生IFN-γ,该诱导作用在于预4h即显著表现,并维持至少24h.