组织微环境中细胞外囊泡的分离纯化及其理化特征

• 作者: 叶誉胜 曾韬 王越 黎力
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞外囊泡 外泌体 组织微环境 纯化
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 专题报道: 外泌体相关进展与基础研究
• 页码范围: 726-730
• 页数: 5页
• 分类号: R329.29
• 语种: 中文
• DOI: 10.16781/j.0258-879x.2018.07.0726

摘要

目的 通过对比不同方法抽提的不同组织中的细胞外囊泡的差异和特点,探寻组织中细胞外囊泡的分离纯化方法,为组织微环境中细胞外囊泡的功能和机制研究奠定基础.方法 采用胶原酶消化法对肾脏、前列腺、皮肤和胃4种组织进行脱细胞处理,制备细胞外基质悬液,分别采用Qiagen外泌体抽提试剂盒、SBI外泌体抽提试剂盒及超速离心法(UC)抽提细胞外囊泡,然后使用ATS粒度分析仪qNano技术检测细胞外囊泡的粒径和浓度等.结果 采用3种方法对4种组织的细胞外基质悬液进行抽提,均可获得纯化的细胞外囊泡,主要囊泡类型为外泌体.不同组织中细胞外囊泡粒径分布存在一定的差异,但粒径大小差异无统计学意义(P>0.05).等质量组织中均以UC抽提得到的细胞外囊泡浓度最高,与另外2种方法相比差异有统计学意义(P<0.01);不同组织间比较,以前列腺和肾脏获得的细胞外囊泡浓度较高,而胃和皮肤较低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 不同组织中均以UC抽提得到的细胞外囊泡浓度最高;不同类型组织微环境中存在的细胞外囊泡的浓度有差异.