龙眼Mn-SOD基因的表达及其启动子功能分析

• 作者: 张梓浩 徐小萍 曾丽兰 林玉玲 王亚婷 赖钟雄 陈晓慧 陈裕坤
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 龙眼 Mn-SOD 启动子 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 913-919
• 页数: 7页
• 分类号: Q785|Q789
• 字数: 5845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2018.05.013

摘要

以龙眼胚性愈伤组织为材料,研究龙眼Mn-SOD基因在应答非生物因子和外源激素处理下的转录情况,并利用烟草瞬时转化法分析其启动子的表达活性.结果表明:龙眼胚性愈伤组织中Mn-SOD基因的表达受到红光和蓝光的抑制;而在白光处理下,Mn-SOD呈现先上升再下降的趋势,在绿光中,则是先下调再上升.在盐胁迫处理下,Mn-SOD基因的表达受到抑制,在蔗糖和不同天数处理中则不受影响.在一定浓度范围内,外源激素IAA、GA3、MeJA、SA和ETH均能诱导或抑制龙眼胚性愈伤组织中Mn-SOD基因的表达,提示其参与外源激素的应答.构建4个不同启动子缺失片段驱动报告基因GUS的植物表达载体并转化烟草.结果表明,龙眼Mn-SOD基因4个不同启动子缺失片段启动GUS基因的能力均低于CaMV35S启动子,但均可启动GUS基因的表达.瞬时表达和定量表达结果显示,3'缺失的MSD-pro4(-669～-267 bp)启动GUS基因的能力最强,其次为5'缺失的MSD-pro1(-669～-1 bp),最弱的为MSD-pro2(-432～-1bp)和MSD-pro3(-267～-1 bp),提示Mn-SOD启动子-669～-432 bp区段内含有重要的正向顺式调控元件;而-432～-1 bp区段含有负调控元件.