牛奶及水样中泰乐菌素酶联免疫检测方法研究

• 作者: 姚婵媛 孙远明 徐振林 杨金易 沈玉栋 王弘 田元新 雷红涛
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 间接竞争酶联免疫吸附分析 泰乐菌素 牛奶 水样
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1275-1281
• 页数: 7页
• 字数: 5680字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.181057

摘要

针对环境及食品中泰乐菌素残留问题,本研究将泰乐菌素分子结构侧链醛基一步直接氧化为羧基,并将其作为新的半抗原,通过免疫新西兰大白兔制备了特异性的抗泰勒菌素多克隆抗体,优化的反应条件为:包被原稀释6000倍,抗体稀释2000倍,反应缓冲液为pH 7.4、吐温含量0.1％、离子浓度0.01mol/L的PBST,二抗稀释倍数为4000倍,二抗反应时间30min.在此优化条件下,建立了检测泰乐菌素的间接竞争酶联免疫分析法(icELISA),半数抑制浓度(IC50)为1.39ng/mL,线性范围(IC20～IC80)为0.17～11.0ng/mL,检出限(IC10)为0.07ng/mL,与结构功能类似物交叉反应率均小于0.1％.对纯牛奶、自来水、鱼塘水中泰乐菌素的添加回收率在78.4％～105.6％之间,RSD<15％,检测结果与HPLC-MS/MS方法具有良好的相关性(R2=0.97).本研究建立的icELISA方法适用于牛奶及水样中泰乐菌素残留的特异性快速筛查.