樗蚕孵化酶基因的克隆与表达特征分析

• 作者: 冉艳萍 刘龙山 唐顺明 安春梅 宋宪军 浦月霞 贾雪峰 黄景滩 龚美霞
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 樗蚕 孵化酶 基因克隆 表达特性
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 382-389
• 页数: 8页
• 分类号: S885.9|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2018.03.005

摘要

樗蚕(Philosamia cynthia cynthia)是重要的野蚕资源.为从分子水平研究樗蚕的孵化机制,以催青第9天的樗蚕卵为材料提取总RNA并反转录合成cDNA,根据鳞翅目昆虫孵化酶基因的保守序列设计简并引物,通过RACE-PCR获得樗蚕孵化酶基因全长cDNA,命名为PccHE(GenBank登录号:MH 119084).PccHE基因cDNA全长为964 bp,由5’-UTR、3’-UTR和885bp的ORF组成,编码294个氨基酸;PccHE蛋白序列合有孵化酶特征序列锌指结合基序和Met-转角基序;基于PccHE氨基酸序列与16种动物孵化酶同源氨基酸序列构建的系统进化分析树显示,樗蚕与蓖麻蚕之间的亲缘关系最近.半定量RT-PCR检测PccHE在樗蚕胚胎发育早期的表达维持在较低水平,催青第3天小幅度增加,第9天时表达水平开始大幅上升,至孵化前达到最高水平;PccHE在5龄3d幼虫中肠中高水平表达,并且在马氏管中也有表达,这是首次在昆虫马氏管中发现孵化酶基因的表达.上述结果表明,PccHE与樗蚕的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程.