沉默YAP通过Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌BGC823细胞的凋亡

• 作者: 刘志强 张伟 张志忠 张艳 李保中 李守淼 王子铭
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 胃癌 YAP 凋亡 Wnt/β-catenin
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 864-869
• 页数: 6页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2018.18.0495

摘要

目的 本研究探讨Yes相关蛋白(YAP)对胃癌BGC823细胞凋亡的影响.方法 BGC823细胞中转染YAP小干扰RNA(YAP siRNA1、YAP siRNA2),用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别测定细胞中YAP表达,筛选干扰效果较好的YAP siRNA1做后续实验.MTT测定细胞增殖,平板克隆实验测定克隆形成能力,流式细胞术测定凋亡情况,分光光度法检测Caspase-3、Caspase-9活性,蛋白质印迹法检测β-catenin、c-myc、CyclinD1蛋白水平.用Wnt/β-catenin的激活剂处理下调YAP后的BGC823细胞,按照上述方法测定细胞增殖凋亡和克隆形成能力.结果 YAP siRNA1、YAP siRNA2下调BGC823细胞中YAP的转录和表达,YAP siRNA1对YAP表达的干扰效率较好.敲低YAP后的细胞增殖能力、克隆形成能力降低,细胞凋亡率由(6.32±0.58)％升高至(32.71±2.64)％,Caspase-3、Caspase-9活性升高,β-catenin、c-myc、cyclinD1蛋白表达减少,与正常培养的BGC823细胞相比,差异有统计学意义(P＜0.05).Wnt/β-catenin的激活剂处理可以部分逆转敲低YAP对BGC823细胞的凋亡、增殖、克隆形成能力和细胞中Caspase-3、Caspase-9活性的影响.结论 YAP敲低诱导胃癌细胞凋亡,且作用机制与抑制Wnt/β-catenin通路激活有关.