山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化过程中内参基因的表达稳定性分析

• 作者: 朱江江 林亚秋 林森 王永 许晴
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 肌内前体脂肪细胞 内参基因 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 907-918
• 页数: 12页
• 分类号: S827.2
• 字数: 7472字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.05.005

摘要

旨在通过比较9个内参基因在山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化不同时期的表达水平进而最终确定适合山羊肌内前体脂肪细胞分化调控研究最佳的内参基因.本研究利用胶原酶消化法获得山羊肌内前体脂肪细胞,并以分别诱导0、1、2、3、5和6d的细胞为研究对象,利用荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)技术和geNorm、NormFinder和BestKeeper程序来检测和分析9个候选内参基因(GAPDH、PPIA、18S rRNA、PPIB、UXT、RPLP0、ACTB、EIF3K和TBP)表达的稳定性,并以KLF3和KLF12的实际表达水平进行校正分析.geNorm和NormFinder程序分析表明,UXT稳定性相对最好;而BestKeeper程序分析发现,PPIB表达相对最平稳;3种软件分析结果均表明,同时使用UXT和PPIB可以准确校正在山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化不同时期目标基因的表达;通过对KLF3和KLF12表达量的分析发现,选用筛选结果中最稳定(UXT和PPIB、UXT)和最不稳定(EIF3K和18S rRNA)的内参基因进行归一化分析结果有差异.在山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化过程中,UXT基因是适合于山羊肌内前体脂肪细胞的成脂诱导分化研究最稳定有效的内参基因,同时使用UXT和PPIB作为内参基因能够获得更加精确的目标基因表达结果,这为后续山羊前体脂肪细胞分化调控相关基因的功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永	西南民族大学生命科学与技术学院	169	1040	16.0	22.0
3	林亚秋	西南民族大学生命科学与技术学院	94	277	9.0	11.0
6	朱江江		16	28	3.0	4.0
7	林森	西南民族大学生命科学与技术学院	10	21	3.0	4.0
9	许晴	西南民族大学生命科学与技术学院	10	20	3.0	4.0