高压力对角膜内皮细胞损伤微观机制的研究

• 作者: 幸正茂 廖洪斐 梁玲玲 袁进
• 来源期刊: 眼科
• 关键词: 超微机制 压力 仿生培养 角膜内皮细胞
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 36-41
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13281/j.cnki.issn.1004-4469.2018.01.008

摘要

目的 探讨高压力对兔角膜内皮细胞损伤的微观机制.设计实验研究.研究对象仿生培养的兔角膜内皮细胞.方法 将体外培养的第一代兔角膜内皮细胞(rabbit corneal endothelial cells,RCEC)分为五组:A组30 mmHg压力组,B组压力波动组,将压力设为15～25～20～10 mmHg,每个压力持续6小时,C组50 mmHg压力组,D组正常压力组,E组无压力组.免疫法鉴定原代角膜内皮细胞;流式细胞术检测细胞活性;Western蛋白印迹法检测细胞中蛋白BcL-2和P53表达;RT-PCR检测Fas/FasL的表达;免疫荧光检测细胞胞浆细胞色素C(Cytc)的表达.主要指标兔角膜内皮细胞蛋白BcL-2、p53表达以及Fas/FasL和Cytc的表达.结果 获取的所有细胞证实为角膜内皮细胞表型,无角膜上皮细胞及基质细胞污染.细胞分别培养24h后,流式细胞术分析发现高压力组细胞存活率明显下降,而受损的细胞大部分处于凋亡状态;Western蛋白印迹法结果显示:在30 mmHg组、50mmHg组和压力波动组中蛋白P53相对表达量(OPTDI P53/OPTDIactin)分别为(0.253±0.014)、(0.670±0.019)、(0.474±0.016),明显高于正常压力组(0.009±0.003)(F=1210,P=0.000);RT-PCR检测各组中各时间段Fas/FasL的表达均为阴性;在高压力组中,免疫荧光检测发现细胞胞浆中Cytc呈阳性表达.结论 高压力对角膜内皮细胞损伤是通过细胞凋亡介导,而压力调控下细胞凋亡途径的启动是角膜内皮细胞Cytc从线粒体释放入胞浆,通过激活凋亡的内源性途径实现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁进		40	317	9.0	17.0
2	梁玲玲		1	0	0.0	0.0
3	幸正茂		1	0	0.0	0.0
4	廖洪斐		1	0	0.0	0.0