Sleeping Beauty转座子介导敲低PEX2转基因载体的构建

• 作者: 孙潇 张丹 蔡梦娇 韩苏夏
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 过氧化物酶体生物合成因子2 Sleeping Beauty转座子 水动力法尾静脉注射 小鼠 肝癌
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1257-1263
• 页数: 7页
• 分类号: R730.55
• 字数: 5277字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2018.09.003

摘要

目的 借助Sleeping Beauty(SB)转座系统在小鼠肝脏中稳定过表达原癌基因MYC诱导小鼠肝癌形成,并在SB转座子pT3EF1α-c-Myc基础上构建可在小鼠体内敲低PEX2的重组转基因载体.方法 借助水动力法尾静脉注射(Hydrodynamic tail vein injection,HTVI)和SB转座子系统向小鼠肝脏导入携带目的基因MYC的转座子质粒,诱导小鼠肝癌形成.以载体为模板,分别扩增U6-shNC、U6-shPEX2序列,通过T4连接获得目标载体pT3EF1α-c-Myc-shNC、pT3 EF1α-c-Myc-shPEX2.结果 ①实验组小鼠成功诱导出肝癌.②经酶切和测序等方法鉴定,构建质粒完全正确.③细胞瞬时转染实验质粒pT3 EF1α-c-Myc-shPEX2及其对照质粒pT3EF1α-c-Myc-shNC,确定在小鼠肝癌细胞Hepa1-6中实验组质粒可以降低PEX2的mRNA水平.结论 借助HTVI技术和SB转座系统过表达c-Myc成功诱导小鼠肝癌形成,并在SB转座子质粒pT3EF1a-c-Myc基础上构建了可在小鼠肝癌细胞Hepal-6中敲低PEX2基因的重组转基因载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩苏夏	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	55	305	11.0	15.0
2	张丹	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	73	250	9.0	13.0
3	孙潇	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	8	30	3.0	5.0
4	蔡梦娇	西安交通大学第一附属医院肿瘤放疗科	7	3	1.0	1.0