PCV-2d基因型的PCR-RFLP诊断方法的建立

• 作者: 吴昊宸 张誓育 王全溪 许文煌 郑庆礼 黄瑞玲
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 猪圆环病毒2型 基因型 限制性片段长度多态性聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 446-451
• 页数: 6页
• 分类号: S852.651
• 语种: 中文
• DOI: 10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2018.04.011

摘要

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)有多个基因型,其中基因型d的感染率仅次于基因型b,建立PCV-2d基因型的PCR-RFLP诊断方法具有重要意义.根据NCBI中PCV2 Cap基因序列,设计1对特异性引物,并选择PCV-2d特异的酶切位点MSPI进行酶切,对酶切的体系和条件进行优化,同时进行敏感性、重复性试验.结果表明:PCR总体积25μL,模板量2μL,退火58℃,35个循环为PCR反应最佳条件,目的片段702 bp;MSPI酶能将PCV2d特异地切出2个条带474、228 bp.酶切体系为12.5μL、MSPI酶1μL、酶切时间1 h;该酶切体系的最低模板量为10 ng·μL-1,重复性好.送检的24份病料的PCV2d阳性率为33.3％.可见,本研究建立的PCV-2d基因型的PCR-RFLP鉴别诊断方法,特异、敏感.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全溪	福建农林大学动物科学学院	82	817	14.0	27.0
2	郑庆礼	福建农林大学动物科学学院	3	1	1.0	1.0
3	张誓育	福建农林大学动物科学学院	4	0	0.0	0.0
4	黄瑞玲	福建农林大学动物科学学院	3	0	0.0	0.0
5	吴昊宸	福建农林大学动物科学学院	1	0	0.0	0.0
6	许文煌	福建农林大学动物科学学院	1	0	0.0	0.0