猪流行性腹泻病毒E基因真核表达载体的构建及融合蛋白的表达

• 作者: 张华 张雅婷 徐嘉欣 曹宏伟 李兴志 武雪宁 沈玉江 王显赫 程丽鑫 邹德华 郑亮
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: PEDV E基因 载体构建 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 81-85
• 页数: 5页
• 分类号: S858.28
• 字数: 2571字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2018.04.015

摘要

E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体.通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1载体,酶切鉴定及测序结果证实PEDV E基因成功克隆到pEGFP-N1中,并将重组质粒命名为pEGFP-N1-E.将pEGFP-N1-E转染HeLa,利用Western Blot和免疫荧光技术检测pEGFP-N1-E的表达以及定位情况,结果显示pEGFP-N1-E在HeLa细胞中成功表达,并且在胞质胞核均匀分布.结果表明:pEGFP-N1-E已被成功构建,并且在HeLa细胞中正确表达.为后续研究关于E基因的功能及其在抗病毒中所发挥的作用等方面奠定了研究基础.