海蜇Frizzled1基因的克隆及在无性繁殖中的表达

• 作者: 周春娅 庄志猛 朱玲 潘滢 陈四清
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 海蜇 Frizzled cDNA 基因组结构 整体原位杂交 无性繁殖
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1335-1346
• 页数: 12页
• 分类号: S917
• 字数: 6011字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2018.17407

摘要

采用RACE技术解析了海蜇(Rhopilema esculentum) Frizzled1基因的eDNA和基因组结构:Re-Fzd1基因的全长cDNA为2387bp,其中编码区为1761 bp,编码586个氨基酸的多肽.SMART分析表明,Re-Fzd1基因具备Fzd家族共同的结构特征,包括:一个由23个氨基酸组成的信号肽,一个位于N-末端富含10个保守半胱氨酸残基的半胱氨酸富集域(CRD),一个含有7个跨膜片段的跨膜结构域,以及一个含有5个重要的磷酸化位点的C端尾巴.多序列比对表明,Re-Fzd1基因与刺胞动物贝螅(Hydra echinata)、水螅(Hydra vulgaris)、半球美螅水母(Clytia hemisphaerica)和海葵(Nematostella vectensis) Fzd1具有高度相似性,与来自脊椎动物人(Homo sapiens)、鼠(Musmusculus)、爪蟾(Xenopus laevis)和斑马鱼(Danio rerio)的Fzd1、Fzd2和Fzd7家族基因也具有较高的同源性.基于N-J法,将人、鼠、爪蟾、斑马鱼和果蝇(Drosophila melanogaster)所有Fzd家族基因系统进化分析显示,除果蝇外,所有Fzd家族成员聚类成4个类群,11个亚家族,海蜇Re-Fzd1基因首先与刺胞动物门的Fzd1聚类在一起,然后与脊椎动物Fzd1、Fzd2和Fzd7三个家族聚成一个类群,表明脊椎动物Fzd1、Fzd2和Fzd7家族可能与刺胞动物门的Fzd1起源于同一个共同祖先.Re-Fzd1基因组序列中不含有内含子.实时荧光定量PCR结果显示,Re-Fzd1基因在海蜇无性繁殖的4个发育阶段均有表达,其中,表达量最高的横裂体阶段是表达量最低的稚水母阶段的3.67倍.整体原位杂交显示,在海蜇横裂体时期,Re-Fzd1原位表达在触手、基座及发生横裂的部位.这些结果都表明,Re-Fzd1不但参与了海蜇的早期发育过程,还调控了海蜇无性繁殖的发生.