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时间分辨免疫荧光法检测结核感染T细胞释放γ-干扰素的方法建立及初步临床应用
时间分辨免疫荧光法检测结核感染T细胞释放γ-干扰素的方法建立及初步临床应用
作者:
吴能伟
朱应竹
江燚
谭玉华
陶佳俊
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
结核分枝杆菌
T细胞
γ-干扰素释放试验
时间分辨免疫荧光法
性能评估
摘要:
目的 建立一种检测结核感染T细胞释放 γ-干扰素(IFN-γ)的时间分辨免疫荧光法(TRFIA)及初步临床应用.方法 选择73例结核分枝杆菌阳性的肺结核患者,77例结核分枝杆菌阴性的肺结核患者,25例肺外结核患者,52例呼吸道疾病以外的非结核患者,70例非结核呼吸道疾病(含肺癌)患者作为研究对象.利用早期分泌抗原靶蛋白6(ESAT6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)作为结核分枝杆菌特异性抗原,刺激患者全血标本中的结核分枝杆菌抗原特异性T细胞释放IFN-γ.植物血凝素L作为有丝分裂原,可非特异地刺激IFN-γ的产生.应用双抗体夹心TRFIA定量测定血浆中的IFN-γ浓度.评价TRFIA检测IFN-γ的精密度、检测低限、生物检测限、功能灵敏度、线性、准确度和特异度等分析性能指标,并与酶联免疫法(ELISA)进行比对试验研究.方法间结果差异比较采用χ2检验,P<0.05为差异具有统计学意义.结果 TRFIA检测IFN-γ的捕获抗体包被浓度为5.0μg/ml,生物素标记抗体使用工作稀释度为1:1800和铕标记物使用工作稀释度为1:500;实验内变异系数(CV)<5%,实验间CV<10%;检测低限0.69 pg/ml,生物检测限0.90 pg/ml,功能灵敏度1.80 pg/ml;线性范围2~5000 pg/ml;检测国际生物标准参考品的偏倚不超过5%;其他常见的细胞因子和常见内源性干扰物(胆红素、血红蛋白和三酰甘油)样本对该方法检测结果无明显影响.TRFIA检测297例临床样本结果判断与临床诊断的一致率可达85.19%;TRFIA与ELISA的结果具有高度一致性(κ=0.9931),且TRFIA与ELISA的阳性检出率结果差异无统计学意义(χ2=0,P>0.05).结论 TRFIA检测IFN-γ的精密度好,灵敏度高,线性范围宽,准确度好,特异度强,临床符合率高,能满足临床检测需要.
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文献信息
篇名
时间分辨免疫荧光法检测结核感染T细胞释放γ-干扰素的方法建立及初步临床应用
来源期刊
现代检验医学杂志
学科
医学
关键词
结核分枝杆菌
T细胞
γ-干扰素释放试验
时间分辨免疫荧光法
性能评估
年,卷(期)
2018,(6)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
21-25
页数
5页
分类号
R378.911|R392-33
字数
5319字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1671-7414.2018.06.006
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
谭玉华
广州市丰华生物工程有限公司体外诊断试剂研发中心
17
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2
朱应竹
广州市丰华生物工程有限公司体外诊断试剂研发中心
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江燚
广州市丰华生物工程有限公司体外诊断试剂研发中心
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陶佳俊
广州市丰华生物工程有限公司体外诊断试剂研发中心
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吴能伟
广州市丰华生物工程有限公司体外诊断试剂研发中心
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γ-干扰素释放试验
时间分辨免疫荧光法
性能评估
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
现代检验医学杂志
主办单位:
陕西省临床检验中心
陕西省人民医院
出版周期:
双月刊
ISSN:
1671-7414
CN:
61-1398/R
开本:
大16开
出版地:
西安市友谊西路256号陕西省人民医院内
邮发代号:
52-116
创刊时间:
1986
语种:
chi
出版文献量(篇)
6791
总下载数(次)
18
总被引数(次)
21095
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