应用琼脂糖微球抗体筛选原代乳鼠肺微血管内皮细胞新方法的建立

• 作者: 刘丹 刘姗 刘美丽 刘艳霞 张坡 田孝祥 闫承慧 韩雅玲
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳鼠 肺微血管内皮细胞 原代培养
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 424-428
• 页数: 5页
• 分类号: R331
• 字数: 3464字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2018.05.12

摘要

目的 建立一种简便、高效的原代乳鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)培养新方法.方法 选取小于1周龄的C57BL/6乳鼠,采用琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养原代PMVECs.倒置显微镜观察细胞形态,采用CD31、血管性血友病因子(vWF)相关抗原免疫荧光染色以及基质胶体外成血管实验鉴定内皮细胞,采用CCK-8法绘制细胞生长曲线.结果 倒置显微镜下观察培养的原代PMVECs呈短梭形、类圆形,单层融合呈铺路石样排列.CD31相关抗原、vWF免疫荧光染色阳性,阳性率分别为91.35％±3.06％、92.99％±2.67％,证实培养的细胞为PMVECs.PMVECs接种在基质胶上8h后,有血管腔结构形成.CCK-8法绘制的生长曲线显示,琼脂糖微球抗体筛选法提取PMVECs培养2～5d后细胞处于对数生长期.结论 琼脂糖微球抗体筛选法分离、培养乳鼠原代PMVECs简便、高效,是一种值得推广的分离培养乳鼠PMVECs的新方法.