利用CRISPR/Cas9技术的烟草NtLS基因敲除分析

• 作者: 张剑锋 曹培健 杨军 林福呈 武明珠 潘婷 王中 王姗姗 谢小东
• 来源期刊: 烟草科技
• 学科: 工学
• 关键词: NtLS基因 CRISPR/Cas9 基因组编辑 腋芽
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 烟草农学
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 分类号: TS413
• 字数: 5822字
• 语种: 中文

摘要

为了培育无腋芽或少腋芽烟草,基于CRISPR/Cas9系统,对烟草NtLS基因进行靶向基因组编辑,构建了2个特异靶向NtLS基因的CRISPR/Cas9载体cLS1和cLS2,并借助农杆菌介导的烟草转基因技术转化烤烟品种K326,获得20株抗卡那霉素的阳性烟株.10株阳性烟株经过PCR扩增、测序和比对,检测到2株发生蛋白翻译错误的T0突变烟株.研究结果不仅为腋芽形成的分子机理研究创制了有价值的突变体,而且为培育无腋芽或少腋芽优质烤烟品系提供了遗传材料.