豚鼠耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞的原代培养及鉴定

• 作者: 司超 张亮 张伟 张治平 李丽 李新芝 王洋 肖靖杰 马克涛
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 豚鼠 耳蜗螺旋动脉 细胞培养 肌动蛋白
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 917-921
• 页数: 5页
• 分类号: R764
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201806029

摘要

目的联合2种常用的细胞培养方法从豚鼠耳蜗螺旋动脉中提取平滑肌细胞,为相关实验研究提供材料.方法从豚鼠耳蜗中分离出螺旋动脉,应用1.25 g/L的胰蛋白酶进行消化并将组织块贴壁,运用自然纯化法及根据不同细胞贴壁能力的差异性对细胞进行纯化,通过形态学观察及免疫荧光、免疫组化和Western blot对细胞进行鉴定.结果85％的组织块存活,第4代平滑肌细胞纯度达95％.镜下可见细胞呈典型的"峰-谷"样生长,免疫荧光、免疫组化及Western blot结果显示平滑肌细胞特异性的肌动蛋白呈阳性表达.结论通过本研究方法,可以得到大量高纯度的豚鼠耳蜗螺旋动脉平滑肌细胞,有望为内耳循环系统紊乱导致的病理生理变化的体外研究及血管平滑肌药物评价提供一个理想的研究材料.