棉花VIGS病毒载体的构建 及其在抗病基因功能鉴定的应用

• 作者: 常晓春 李建平 李琴 足木热木·吐尔逊 郝晓燕 陈勋基 陈果 高升旗 黄全生
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 钙依赖蛋白基因 VIGS 黄萎病
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 页码范围: 1203-1208
• 页数: 6页
• 分类号: S562|S188
• 字数: 3114字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2018.07.004

摘要

[目的]利用农杆菌介导的VIGS基因沉默技术,研究陆地棉抗病相关基因在棉花抗黄萎病中的功能.[方法]利用分子生物学技术构建VIGS病毒载体,建立VIGS病毒诱导沉默体系;利用此体系将棉花中的一个钙依赖蛋白(CDPK)基因,通过农杆菌介导在陆地棉中沉默,根据此基因沉默植株在病原菌环境下的发病情况研究该基因在棉花抗病中的功能.[结果]利用包含有GhCPK抗病基因片段的VIGS病毒载体的农杆菌侵染棉花子叶,病毒载体上的目的基因片段由RNA聚合酶识别并合成双链RNA(double stranded RNA,dsRNA),dsRNA由Dicer酶识别并于其它RNA形成RNA诱导的沉默复合体(RNA induced silencing complex,RISC),RISC对内源GhCPK mRNA进行识别和切割作用,内源GhCPK mRNA降解而发生基因沉默.GhCPK基因沉默导致棉苗对黄萎病敏感性增加,证明GhCPK基因参与调控棉花抗病功能.[结论]病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)能够快速有效的研究GhCPKs基因在棉花抗病中的功能.