microRNA-182抑制人角膜上皮细胞增殖和迁移

• 作者: 敬霞 曹琼洁 王教 瞿佳 赵晓婷 闫东升 陈晓燕
• 来源期刊: 中华眼视光学与视觉科学杂志
• 关键词: 角膜损伤修复 miR-182 角膜上皮细胞 增殖 迁移
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 503-508
• 页数: 6页
• 字数: 4229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2018.08.009

摘要

目的:通过体内动物实验与体外细胞实验来阐明microRNA-182(miR-182)在角膜上皮损伤修复中的功能.方法:实验研究.体内实验选取5只C57BL/6J野生型小鼠,通过机械刮伤法构建小鼠角膜上皮损伤修复模型作为实验组,对侧眼作为对照组,通过实时定量RT-PCR法检测miR-182在损伤修复过程(损伤后48 h)的表达.体外实验采用脂质体介导的方法将miR-182和随机序列寡核苷酸链转染入人角膜上皮细胞(HCECs),通过细胞增殖实验(MTS法)和细胞克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力,流式细胞术检测细胞周期,细胞划痕实验检测细胞迁移能力.MiR-182表达量及细胞实验各参数2组间比较采用独立样本t检验.结果:体内实验中,与对照组相比,实验组中5个样本量的miR-182在角膜上皮损伤修复过程中表达水平显著下调(t=147.6、79.2、136.8、41.3、89.8,均P＜0.001).体外实验中,miR-182组相对细胞数目为(81±5)％,与阴性对照组(100％)相比显著减少(t=6.6,P=0.003),同时miR-182组细胞克隆数明显少于阴性对照组.细胞周期检测结果显示实验组处于G1期细胞数量比例为(49±7)％,明显高于阴性对照组的(35±4)％(t=-3.0,P=0.041).此外,细胞迁移实验结果显示miR-182组HCECs细胞迁移的距离为(99±12)μrn,而阴性对照组的迁移距离为(213±14)μm(t=10.8,P=0.001),迁移速度明显变慢.结论:miR-182通过抑制角膜上皮细胞的增殖与迁移,从而对角膜上皮损伤修复起到负调控的作用.