半滑舌鳎外周血T淋巴细胞的分离、鉴定及TCRβ基因免疫应答分析

• 作者: 孙璐明 杨光 汪林庆 沙珍霞 王航 白莉 陈亚东
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 半滑舌鳎 T淋巴细胞 B淋巴细胞 外周血 TCRβ基因 免疫应答
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 页码范围: 480-487
• 页数: 8页
• 分类号: S942.1
• 字数: 6166字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2018.060

摘要

为开展半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)免疫学研究提供细胞平台, 利用密度梯度离心法分离半滑舌鳎外周血淋巴细胞, 采用短期细胞培养法分离悬浮淋巴细胞, 悬浮淋巴细胞在含有0.3 μg/mL的PHA的DMEM完全培养基, 于24℃条件下可连续培养3—4d左右, 采用自制的尼龙毛柱可将悬浮淋巴细胞中的非黏附淋巴细胞和黏附淋巴细胞成功分离; 利用流式细胞仪结合特异抗体检测对非黏附淋巴细胞和黏附淋巴细胞进行鉴定,结果表明, 非黏附细胞与鼠抗人FTIC-CD3单克隆抗体特异结合, 为T样淋巴细胞; 黏附细胞和鼠抗人FTIC-CD19单抗特异结合,为B样淋巴细胞.T细胞表面抗原受体TCRβ基因可特异性的在非黏膜细胞中表达,而在黏附细胞中不表达, 证明分离获得的非黏膜细胞为T淋巴细胞, 采用qRT-PCR (Quantitative Real-Time PCR)方法检测TCRβ基因表达, 结果表明, TCRβ基因在半滑舌鳎肝、脾、头肾、后肾、小肠、胃、血液、鳃、皮肤、肌肉、心脏、脑、卵巢组织中均有表达, 其中在肠、胃、脾、头肾中表达量较高; 鳗弧菌感染后TCRβ基因在肝、脾、鳃中呈现明显的上调表达,且表达峰值出现在感染后72—96h,表明TCRβ基因在获得性免疫应答中起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王航	福州大学生物科学与工程学院	17	107	5.0	10.0
2	杨光	青岛大学生命科学学院	7	25	3.0	5.0
3	沙珍霞	青岛大学生命科	5	6	1.0	2.0
4	陈亚东	青岛大学生命科学学院	3	6	1.0	2.0
6	汪林庆	福州大学生物科学与工程学院	2	5	1.0	2.0
12	白莉	青岛大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0
13	孙璐明	青岛大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0