Parkin基因过表达质粒和细胞模型的构建

• 作者: 冯琬迪 孙红梅 张淑静 强天遥 毛颖秋 盖聪 胡京红 郭振宇 马浩洁 高誉珊
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 帕金森病 Parkin SH-SY5Y细胞 质粒 转染
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 407-412,406
• 页数: 7页
• 分类号: R-33|Q78|R742.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2018.03.002

摘要

目的:构建Parkin基因过表达质粒并转染SH-SY5Y细胞,为进一步研究帕金森病的发病机制及中药的作用环节奠定基础.方法:首先构建Parkin基因过表达质粒,采用脂质体转导技术,将Parkin过表达质粒应用Lipo3000转染SH-SY5Y细胞.荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的表达;RT-PCR检测其ParkinmRNA的表达;Western Blot技术检测其Parkin蛋白的表达.结果:转染组可观测到较多的绿色荧光蛋白表达;Parkin过表达细胞ParkinmRNA和蛋白的表达均显著提高(P＜0.01).结论:通过脂质体转导技术,应用Lipo3000可将Parkin过表达质粒成功转染入SH-SY5Y细胞,转染的基因和蛋白表达均较高,提示此法可成功构建Parkin基因过表达的细胞模型.