二重荧光RT-LAMP方法鉴别检测口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒

• 作者: 刘加波 张艳芳 曾婷婷 王盛 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 水泡性口炎病毒 二重荧光RT-LAMP 检测
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 996-1004
• 页数: 9页
• 分类号: S852.659.6|S852.659.5
• 字数: 5203字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.05.014

摘要

口蹄疫和水泡性口炎是牛常见高度急性病毒传染病,在全球范围内广泛存在.本研究旨在建立一种可同时鉴别口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP检测方法.根据口蹄疫病毒(FMDV) 3D基因和水泡性口炎病毒(VSV)N基因的保守序列,设计了2套特异性引物,在每条内引物的5'端标记荧光基团,通过扩增产物颜色判断检测结果.优化反应条件,建立了可同时检测口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒的二重荧光RT-LAMP方法.结果显示,该方法灵敏性高,每个反应最低能够检测到100个拷贝混合模板;特异性好,能在同一个反应管里检测到两种病毒,对其他牛病原体无扩增;干扰性小,扩增效率不受模板浓度影响.本研究建立的口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒二重荧光RT-LAMP方法具有简便、快速、特异、敏感等优点,可用于FMDV和VSV的临床检测和流行病学调查.