绿色魏斯氏菌实时荧光定量聚合酶链式反应检测方法的建立

• 作者: 于涛 姜晓冰 孙丽滢 张艺鸽
• 来源期刊: 肉类研究
• 学科: 工学
• 关键词: 绿色魏斯氏菌 实时荧光定量PCR SYBRGreenⅠ rpoA基因
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 41-46
• 页数: 6页
• 分类号: TS251.5
• 字数: 4958字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/rlyj1001-8123-201811007

摘要

以rpoA基因为靶基因,建立绿色魏斯氏菌SYBR GreenⅠ实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)快速检测方法.针对rpoA基因设计特异性引物,建立绿色魏斯氏菌实时荧光定量PCR检测体系,通过特异性、灵敏度和重复性实验评价体系的检测效果,同时与常规PCR方法进行比较.结果表明:实时荧光定量PCR方法能够特异性检出绿色魏斯氏菌,对基因组DNA的检测灵敏度达到2.667×10-3 pg/μL,对纯培养物和模拟污染牛肉样品直接检测的灵敏度分别为30 CFU/mL和0.8 CFU/g;与常规PCR相比,实时荧光定量PCR检测的灵敏度是其1000倍;不同浓度样品独立重复实验循环阈值的标准差均小于1,变异系数在0.02％～1.28％之间.本研究所建立的绿色魏斯氏菌实时荧光定量PCR检测方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好的特点,能够进行准确的定量检测,是快速检测绿色魏斯氏菌的有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于涛	新乡学院生命科学技术学院	13	59	5.0	7.0
2	姜晓冰	河南师范大学生命科学学院	15	44	4.0	6.0
3	张艺鸽	河南师范大学生命科学学院	2	7	1.0	2.0
4	孙丽滢		2	0	0.0	0.0